秦晓杰¹ , 朱永平² , 王小巧¹ , 李琼洁¹ , 赵兴富¹ , 和凤美¹

1 云南农业大学园林园艺学院, 昆明, 650201;
2 云南农业大学农学与生物技术学院, 昆明, 650201
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 18 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000600
收稿日期: 2013年01月22日    接受日期: 2013年04月05日    发表日期: 2013年05月27日

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百合原生质体培养对百合远源杂交育种具有重要意义。本研究以东方百合‘Sorbonne’花托为外植体，诱导胚性愈伤组织，并对其原生质体提取和培养进行初步研究。结果表明：MS+Picloram 3 mg/L为胚性愈伤组织诱导最佳培养基；胚性愈伤组织在酶解液为2%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.05%果胶酶Y23+147 mg/L二水合氯化钙+976 mg/L 2-吗啉乙磺酸+0.6 mol/L甘露醇，酶解12 h，制备的原生质体产量最高达4×10⁵个/mL，活性达52%；在胚性愈伤组织诱导培养基中进行原生质体的悬滴培养、液体培养、固体培养、固液结合培养和看护培养。结果表明，看护培养是最佳培养方法，并在改良MS+Picloram 2 mg/L的培养基中培养2~3 d观察到长细胞壁的原生质体，培养4~6天，可见原生质体的第一次分裂，培养40~45 d，观察到原生质体分化成的细胞团。

Sorbonne；原生质体；再生细胞；分裂